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酶标抗体效价测定程序

各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):

1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;

2、37°C包被60min或4°C过夜;

3、PBST洗板3次,5min/次;

4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;

5、37°C 30min;

6、PBST洗板5min/次×3;

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;

8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;

9、450nm 测定OD值;

10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。

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