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常用试剂的配制
1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2 PBS
  • 试 剂
  • 质量/容量
  • NaH2PO4·2H2O
  • 0.39克
  • Na2HPO4
  • 1.27克
  • NaCl
  • 0.85克
  • NaN3
  • 200mg
  • H2O(蒸馏水)
  • 至 1000ml
2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液pH7.4,PBST
  • 试 剂
  • 质量/容量
  • NaCl
  • 2.0克
  • KH2PO4
  • 0.2克
  • Na2HPO4·12H2O
  • 2.9克
  • KCl
  • 0.2克
  • NaN3
  • 0.2克
  • H2O
  • 至 1000ml
  • 吐温(Tween)20
  • 0.5ml
  • 注:4°C保存备用
3、包被液(简称CB)pH9.6
  • 试 剂
  • 质量/容量
  • Na2CO3
  • 1.59克
  • NaHCO3
  • 2.93克
  • NaN3
  • 0.2克
  • H2O
  • 至 1000ml
  • 注:密封盖好,4°C存放备用
4、ELISA底物液(可溶性底物)
  • 试 剂
  • 质量/容量
  • 磷酸-柠檬酸缓冲液 pH5.0
  • 0.1mol/L 柠檬酸(21.014克/100ml)
  • 24.3ml
  • 0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml)
  • 25.7ml
  • H2O
  • 50ml
  • 注:4°C存放备用
5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
  • 试 剂
  • 质量/容量
  • 0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL
  • Tris
  • 6.05克
  • HCL(36%)
  • 3.15克(约2.7ml浓HCL)
  • H2O
  • 至 1000ml
  • 注:DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色
6、DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)

称DAB 30mg,用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用;

使用前加入1% H2O2 1ml至1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。

7、3′,3′,5′,5′,-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制

用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用;

使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1% TMB溶液中,再按每毫升TMB加入30% H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。

8、1%离子琼脂胶配制液

作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。

0.05U pH8.6 巴比妥钠-HCL缓冲液。

  • 试 剂
  • 质量/容量
  • 巴比妥钠
  • 23.8克
  • 1mol/L HCL
  • 34.5ml
  • H2O
  • 2150ml
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